컬럼 크로마토 그래피 유기 화학

컬럼 크로마토 그래피러시아 식물학자인 Mikhail Tsvet에 의해 20 세기 초에 개발 된 유기 화학 .에서 가장 다양하고 널리 사용되는 분리 기술 중 하나이며,이 방법은 화합물을 정제하고 천연 생성물을 분리하며 복잡한 혼합물을 분석하는 데 필수 불가능 해졌습니다 ({2}}}}}}}}}}}}}}}은.이 ^}}.를 분석하는 데 필수적이되었습니다. (GC), 컬럼 크로마토 그래피는 대량의 물질을 분리하여 분산 화학의 초석으로 만들 수 있습니다 .이 기사는 컬럼 크로마토 그래피의 원리, 방법론, 응용 프로그램 및 현대적인 진보를 탐구하여 학문 및 산업 실험실에서 지속적인 관련성을 강조합니다 ({5}}}}.

 

► 정지 위상 선택 1) 실리카 겔 (산성)은 극성 화합물을 분리하는 데 이상적입니다 . 2) Alumina (기본 또는 중립)는 극성 또는 방향족 분자에 적합합니다 . 3) 리버스 위상 컬럼 (C 18- 코팅 실리카)은 소수성 화합물 .에 사용됩니다. ► 이동 상 선택 1) 용매 속도와 해상도의 균형을 맞추기 위해 용매 극성이 최적화되어야합니다 . 2) 그라디언트 용리 (점차적으로 용매 극성 증가) 복잡한 혼합물의 분리가 향상됩니다 . ► 열 크기 1) 더 긴 열은 해상도를 향상 시키지만 실행 시간을 증가시킵니다 . 2) 더 넓은 열은 더 큰 샘플 수량 .을 수용합니다. ► 고정 단계의 입자 크기 1) 더 작은 입자 (e . g {., 40–63 µm)는 높은 해상도를 제공하지만 더 높은 압력이 필요합니다 . 2) 더 큰 입자 (100–200 µm)는 중력 구동 컬럼 .에 사용됩니다.

► 열을 포장합니다 적절한 열 준비 . 분리 효율은 다음과 같습니다. 1) 건식 포장 : 고정 상이 컬럼 건조에 붓고 .을 탭하여 압축합니다. 2) 슬러리 포장 : 흡착제는 용매와 혼합되어 슬러리를 형성하고, 기둥에 부어 기포를 최소화하기 위해 .. 면 또는 유리 양모의 플러그는 고정 상을 유지하기 위해 바닥에 배치 한 다음 모래 층을 이어 평평한 표면 .을 보장합니다. ► 샘플 로딩 샘플은 조기 용출을 피하기 위해 최소한의 최소 용매로 용해됩니다 . . 과부하를 사용하여 고정 단계 위에 조심스럽게 레이어링됩니다. 과부하가 열악한 해상도로 이어질 수 있으며 언더로드는 wastes 자원 .입니다. ► 용리 모바일 단계는 . 열을 통해 구성 요소를 세척하기 위해 점진적으로 추가됩니다. . 분수는 자동 분획 수집기 . 분리 진행 상황을 사용하여 테스트 튜브 또는 바이알에서 수집됩니다. 분리 진행 상황은 다음과 같습니다. 1) TLC 분석 : 구성 요소 위치를 추적하기 위해 TLC 플레이트에서 분수를 발견했습니다 . 2) UV-VIS 검출 : UV 램프를 사용하여 발색단을 가진 화합물을 식별하기 . ► 플래시 크로마토 그래피 컬럼 크로마토 그래피의 현대 변형, 플래시 크로마토 그래피는 (펌프 또는 압축 가스를 통해) 용매 흐름을 가속화하기 위해 공기압을 사용합니다. . . 이것은 런타임을 몇 시간에서 몇 분으로 줄이고 더 작은 입자 크기 (15–40 µm) . 플래시 시스템을 사용하여 해상도를 향상시킵니다..

장점

- 확장 성 : 밀리그램에 그람 규모 분리에 적합 .

- 비용 효과 : 최소한의 특수 장비가 필요합니다 .

- 다양성 : 위상 변형을 통해 다양한 화합물 유형에 적응할 수 있습니다 .

 

제한

- 시간 소모 : 전통적인 중력 기둥은 몇 시간이 걸릴 수 있습니다 .

- 용매 소비 : 많은 양의 용매가 종종 필요합니다 .

- 해상도 문제 : 구조적으로 유사한 화합물에서 겹치는 밴드가 발생할 수 있습니다 .

 

► 사례 1 : 생물 활성 화합물의 분리Ginkgo Biloba

목표 : 플라보노이드와 테르 페 노이드를 정화하고 식별합니다Ginkgo Biloba신경 보호 및 항산화 특성이있는 잎 .
방법:

구배 용리를 갖는 실리카 겔 컬럼 크로마토 그래피 (헥산-에틸 아세테이트-메탄올) .

Ginkgolides (Terpenoids) 및 Quercetin Glycosides (Flavonoids)를 포함하여 50 개 이상의 화합물을 분리 하였다.
주요 결과 :

분리는 NMR 및 MS .을 통한 구조적 설명을 가능하게했습니다.

정제 된 화합물은 시험 관내에서 강력한 자유 라디칼 소거 활성을 나타냈다 .

►사례 2 : 합성 약물 중간체의 정제

목적 : 복잡한 합성 혼합물로부터 트리아 졸-함유 키나제 억제제 (화합물 X)를 정제합니다 .
방법:

C18 역상 컬럼 및 아세토 니트릴-물 구배가있는 플래시 크로마토 그래피 .

표적 화합물을 80% 수율 .로 95% 순도로 분리 하였다.
주요 결과 :

플래시 크로마토 그래피는 중력 중심 방법 .에 비해 분리 시간을 60% 줄였습니다.

정제 된 중간체는 추가 의약 화학 최적화 .에 사용되었습니다.

►사례 3 : 다 환식 방향족 탄화수소의 환경 분석 (PAHS)

목적 : 오염 된 토양 샘플에서 PAH를 감지하고 정량화하십시오 .
방법:

샘플 청소를위한 실리카 겔 컬럼 크로마토 그래피, 그 다음 GC-MS 분석 .

그라디언트 용리 (헥산 디클로로 메탄)는 16 개의 우선 순위 PAHS . 분리되었습니다.
주요 결과 :

이 방법은 대부분의 PAH에 대해 0 . 1 ug/kg의 검출 한계를 달성했습니다.

오염 된 사이트가 확인되어 치료 노력을 안내 .

►사례 4 : 키랄 고정 상을 사용한 키랄 화합물의 분리

목적 : 키랄 제약 중간체의 거울상 이성질체 (화합물 Y) .
방법:

모바일 상 .로 헥산-이소 프로판올 (95 : 5)을 사용한 Chiralpak AD-H 컬럼 (아밀로스 기반 고정 상)

(r)- 및 (s)- 침전체는 {1.8.의 해상도 (r)로 분리되었습니다.
주요 결과 :

(r)-에난티머는 10-를 나타냈다.

이 방법은 약물 합성에서 입체 화학적 제어를 가능하게했습니다 .

► 사례 5 : 바이오 이미징을위한 탄소 양자점 (CQD)의 정제

목적 : 원유 용액 반응 혼합물에서 뚜렷한 방출 파장 (450–610 nm)을 갖는 별도의 CQD .
방법:

메탄올-물 그라디언트가있는 실리카 겔 컬럼 크로마토 그래피 .

5 개의 CQD 샘플을 분리하여 녹색 및 황색-녹화 종 .에 대해 25-30%의 양자 수율 (QYS)을 나타냅니다.
주요 결과 :

크기 및 표면 그룹 차이가 활성화 된 분리 .

정제 된 CQD는 세포 영상에서 낮은 세포 독성 및 높은 밝기를 보여 주었다 .

 

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